連花清瘟膠囊/顆粒是應(yīng)用中醫(yī)絡(luò)病理論指導(dǎo)研制的治療病毒類呼吸系統(tǒng)傳染病的創(chuàng)新中藥,具有“清瘟解毒,宣肺泄熱”功能。藥效學(xué)研究顯示連花清瘟具有廣譜抗病毒,抑菌抗炎,退熱止咳化痰,調(diào)節(jié)免疫,提高機(jī)體抗病康復(fù)能力等作用,現(xiàn)已成為應(yīng)對(duì)多種呼吸系統(tǒng)傳染病的代表性中成藥。

連花清瘟具有廣譜抗病毒作用

由廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院呼吸系統(tǒng)疾病國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室研究表明連花清瘟可多環(huán)節(jié)抗甲型流感病毒H3N2,具有綜合抑制、預(yù)防病毒吸附、抑制病毒吸附后復(fù)制增殖以及直接殺傷病毒作用。莫紅纓等采用治療給藥和預(yù)防給藥的不同方式測(cè)定連花清瘟對(duì)甲型H3N2病毒的體外抑制及其時(shí)效關(guān)系,均表現(xiàn)出較好的抑制甲型H3N2病毒的作用,且預(yù)防用藥抑制病毒增殖作用效果最顯著。

軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所采用預(yù)處理、共處理、后處理三種不同給藥方式,證實(shí)連花清瘟能延長H1N1病毒感染小鼠平均存活時(shí)間,減小感染小鼠肺指數(shù),減輕肺組織炎癥病變。另有研究發(fā)現(xiàn)連花清瘟膠囊對(duì)H7N9在內(nèi)的一系列流感病毒具有廣譜抑制作用,調(diào)節(jié)病毒感染免疫反應(yīng)。樊高薇等研究顯示連花清瘟能改善甲型H1N1流感病毒性肺炎小鼠咳嗽、呼吸困難等癥狀,肺組織炎癥細(xì)胞浸潤明顯減少,水腫及充血現(xiàn)象得到緩解,增強(qiáng)小鼠免疫功能,降低炎性反應(yīng)水平,保護(hù)小鼠肺組織的作用。

此外,研究證實(shí)連花清瘟明顯抑制流感病毒FM1、副流感病毒,有效抑制呼吸道合胞病毒(RSV)、腸道病毒71(EV71)、柯薩奇病毒。莫紅纓等證實(shí)連花清瘟通過調(diào)節(jié)炎性細(xì)胞因子表達(dá)以減輕FM1流感病毒引起的小鼠肺部炎癥損傷。丁月文等研究顯示連花清瘟可降低感染呼吸道合胞病毒(RSV)病毒BALB/c小鼠肺部病毒滴度及炎癥細(xì)胞因子水平;通過體外細(xì)胞研究發(fā)現(xiàn)連花清瘟能抑制不同株流感病毒如H1N1、H3N2、H6N2、H9N2、H7N9體外增殖,抑制病毒核衣殼蛋白在感染細(xì)胞中的核輸出;早期干預(yù)(0～2h)可阻斷病毒感染,抑制病毒誘導(dǎo)的NF-kB(核因子激活的B細(xì)胞的κ-輕鏈增強(qiáng))激活,并以劑量依賴方式減輕病毒誘導(dǎo)的IL-6、IL-8、TNF-a、干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10)、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)因表達(dá),證實(shí)連花清瘟具有廣譜抗甲型流感病毒作用。

廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院呼吸系統(tǒng)疾病國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室最新研究證實(shí),連花清瘟對(duì)新冠病毒(SARS-CoV-2)誘導(dǎo)的細(xì)胞病變半數(shù)抑制濃度(IC50)為411.2μg/mL,在給藥濃度為150、300、600μg/mL時(shí),顯著抑制SARS-CoV-2病毒表達(dá)量,具有劑量依賴性,且抑制病毒感染細(xì)胞空斑形成,證實(shí)連花清瘟體外明顯抑制SARS-CoV-2病毒活性;連花清瘟干預(yù)感染病毒48小時(shí)的非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero-E6),結(jié)果顯示其抑制細(xì)胞內(nèi)病毒表達(dá)量,改變細(xì)胞內(nèi)病毒形態(tài),證實(shí)連花清瘟可以抑制細(xì)胞內(nèi)病毒復(fù)制。

此外,中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所研究證實(shí),感染新冠病毒模型組小鼠感染后出現(xiàn)體重下降,平均下降百分比最高為5.75%。與模型組比較,連花清瘟組小鼠感染后第3天和第5天體重可明顯抑制動(dòng)物體重下降(P<0.01);而且與模型組相比,連花清瘟組肺組織炎癥病變有一定程度改善,提示連花清瘟對(duì)新冠模型小鼠肺部炎性損傷和臨床癥狀有一定改善作用。

連花清瘟具有抑菌作用

連花清瘟能有效抑制金黃色葡萄球菌、流感桿菌、肺炎球菌等,抑制金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌甲氧西林耐藥菌株細(xì)菌生物膜形成。

由廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院呼吸系統(tǒng)疾病國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室研究表明,連花清瘟能夠抑制甲型流感病毒(A/PR/8/34)繼發(fā)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的重癥肺炎,能夠抑制病毒疊加細(xì)菌感染導(dǎo)致的肺上皮細(xì)胞黏附因子的表達(dá),抑制各種促炎因子(IL-6、IL-8、TNF-α)的表達(dá),降低炎癥細(xì)胞的浸潤。

廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院呼吸系統(tǒng)疾病國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),非致死劑量的金黃色葡萄球菌(S.aureus)在非致死劑量流感病毒(H1N1)之后的重復(fù)感染在小鼠中同樣致命,這證實(shí)了繼發(fā)感染的嚴(yán)重程度。同時(shí)證實(shí)了連花清瘟對(duì)H1N1繼發(fā)性金黃色葡萄球菌感染所致肺損傷的緩解作用,結(jié)果提示連花清瘟可能對(duì)流感繼發(fā)性細(xì)菌感染疾病有較好的治療作用。

連花清瘟具有抗炎作用

連花清瘟能夠抑制由各種致病因素引起的肺部感染和炎癥反應(yīng)。連花清瘟可有效抑制FM1病毒感染小鼠多種組織細(xì)胞炎性因子,如:TNF-α、IL-1β、白細(xì)胞介素-4(IL-4)、IL-6、白細(xì)胞介素-12(IL-12)、白細(xì)胞介素-13(IL-13)等表達(dá)。崔雯雯等研究發(fā)現(xiàn)連花清瘟通過抑制IKK/IκB/NF-κB信號(hào)通路,抑制炎性細(xì)胞浸潤,改善肺泡上皮細(xì)胞和肺血管內(nèi)皮細(xì)胞連接蛋白的表達(dá),緩解肺組織損傷?？梢种贫妆街滦∈蠖[脹,抑制角叉菜膠致大鼠足腫脹,降低醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性。

許寧等研究證實(shí)連花清瘟降低PM2.5急性暴露大鼠肺泡灌洗液和血清IL-1、IL-6、TNF-α水平,對(duì)PM2.5懸液急性暴露所致肺部炎性損傷具有拮抗作用。汽車尾氣暴露所致小鼠肺損傷研究顯示,連花清瘟通過降低肺組織炎性因子IL-6、IL-1β、IL-4、IL-12、IL-13、TNF-α表達(dá),抑制中性粒細(xì)胞在氣道和肺組織中的聚集,改善肺組織的病理損傷。李琦等通過體外實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)了連花清瘟能夠通過降低MCP-1表達(dá)量和單核巨噬細(xì)胞在肺部感染灶的趨化和募集,進(jìn)而降低了病理性炎癥損傷水平,阻斷了急性肺損傷(ALI)模型動(dòng)物的疾病進(jìn)展。

雷章等研究證實(shí)連花清瘟0.42g/kg可降低MCP-1在大鼠放射性肺損傷組織與血清含量,抑制巨噬細(xì)胞向損傷肺組織中聚集,抑制急性放射性肺損傷大鼠肺組織與血清中主要炎癥因子IL-6與TNF-α的釋放,從而減輕急性放射性肺損傷的炎癥反應(yīng),緩解了大鼠急性放射性肺損傷的癥狀。

許寧等證實(shí)連花清瘟2、4、8g/kg劑量可降低PM2.5急性暴露致肺部炎性損傷大鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF)及血清中TNF-α、IL-1、IL-6水平及血清中TNF-α,對(duì)肺部炎性損傷具有拮抗作用。

韓書芝等則證實(shí)連花清瘟2、4、8g/kg劑量對(duì)PM2.5急性暴露致肺損傷大鼠血清IL-17及肺表面活性蛋白A(SP-A)水平均有不同程度降低,同樣證實(shí)連花清瘟對(duì)肺部損傷有保護(hù)作用。

夏敬文等以香煙熏吸法復(fù)制慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,結(jié)果LHQW治療組血清、肺組織及支氣管肺泡灌洗液中IL-8和TNF-α含量顯著降低。

陳之力研究發(fā)現(xiàn)連花清瘟對(duì)急性肺栓塞(APE)家兔治療后1、2、4和8h使平均肺動(dòng)脈壓(MPAP)、肌鈣蛋白(cTnI)、NT-N端前腦鈉肽(NT-proBNP)、TNF-α、IL-6和IL-1β顯著降低、平均動(dòng)脈壓(MAP)顯著升高,肺栓塞組織中性粒細(xì)胞積累顯著減少。連花清瘟有助于降低APE家兔的機(jī)體炎癥水平,改善動(dòng)脈血?dú)夂脱鲃?dòng)力學(xué)指標(biāo),并減輕心肌損傷。

武漢大學(xué)人民醫(yī)院呼吸與危重病醫(yī)學(xué)科證實(shí),連花清瘟通過抑制p53介導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞凋亡來降低脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的小鼠急性肺損傷(ALI)。許萍等研究表明,連花清瘟膠囊通過恢復(fù)病毒性肺炎小鼠腸內(nèi)微生物群α多樣性和短鏈脂肪酸產(chǎn)生菌水平,改善腸粘膜屏障損傷,減少腸壁免疫反應(yīng),從而減少進(jìn)入肺部的細(xì)菌代謝產(chǎn)物(LPS),激活LPS/TLR4/NF-kB和LPS/TLR4/凋亡途徑,從而減少炎癥細(xì)胞因子的過度分泌,促進(jìn)肺部病毒的清除。

連花清瘟具有退熱止咳化痰作用

張慶宏等采用大腸桿菌內(nèi)毒素致家兔發(fā)熱模型,測(cè)定給藥后不同時(shí)間的體溫變化。結(jié)果連花清瘟能抑制家兔耳緣靜脈注射大腸桿菌內(nèi)毒素后引起的體溫升高,降溫作用可持續(xù)6小時(shí)以上。同時(shí)連花清瘟藥效研究結(jié)果顯示,其對(duì)三聯(lián)菌苗(傷寒、甲型副傷寒和乙型副傷寒)耳緣靜脈注射引起的家兔發(fā)熱有解熱作用,降溫作用可持續(xù)約5小時(shí),可延長小鼠氨水引咳的咳嗽潛伏期,減少咳嗽次數(shù),也可減少豚鼠枸櫞酸引咳的咳嗽次數(shù),還可增加小鼠氣管段酚紅排泌量,從而稀釋痰液,便于排出。

連花清瘟具有調(diào)節(jié)免疫作用

研究顯示,連花清瘟可增強(qiáng)氫化可的松致免疫功能低下模型小鼠的遲發(fā)性超敏反應(yīng),提高環(huán)磷酰胺致免疫功能低下模型小鼠的腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能和血清溶血素抗體水平。同時(shí)對(duì)機(jī)體感染病毒具有免疫調(diào)節(jié)作用,增加FM1感染后CD4+和CD4+/CD8+T細(xì)胞表達(dá)水平,提高小鼠流感病毒后肺組織中γ-IFN水平。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究探討其組方成分與其藥效作用的相關(guān)性,證實(shí)連花清瘟主要通過提高人體免疫力及抑制FcεRI,ErbB, MAPK等炎癥通路治療新冠肺炎。

連花清瘟藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究

廈門大學(xué)吳彩勝教授聯(lián)合海軍軍醫(yī)大學(xué)柴逸峰教授團(tuán)隊(duì)在連花清瘟防治新冠肺炎藥理活性成分研究方面取得新進(jìn)展,基于高分辨質(zhì)譜(HRMS)和智能非靶向數(shù)據(jù)挖掘以及全新的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)生物色譜技術(shù),成功鑒定體內(nèi)連花清瘟85個(gè)相關(guān)成分,其中苦杏仁苷、野黑櫻苷、甘草酸、連翹苷A、連翹苷I、大黃酸、蘆薈大黃素等都與ACE2有親和力,通過墨蝶呤還原酶(SPR)、ACE2活性抑制和分子對(duì)接實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步進(jìn)行活性評(píng)價(jià),發(fā)現(xiàn)大黃酸,連翹酯苷A,連翹酯苷I,新綠原酸及其異構(gòu)體均對(duì)ACE2具有較高的抑制作用。這些化合物可通過阻斷新冠病毒S蛋白與ACE2結(jié)合以及結(jié)合在新冠病毒S蛋白-ACE2復(fù)合體表面抑制SARS-CoV-2,協(xié)同發(fā)揮治療作用。

長春大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)藥理教研室研究表明,連花清瘟通過AGE-RAGE通路調(diào)節(jié)IL-6的表達(dá),能夠明顯抑制LPS誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。進(jìn)一步針對(duì)連花清瘟中的主要活性成分槲皮素、木犀草素、黃芩素進(jìn)行藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn),這些成分能夠穩(wěn)定結(jié)合在IL-6受體的β亞基,具有阻斷SARS-Cov-2的冠狀病毒S蛋白(Spike蛋白)激活I(lǐng)L-6受體潛在作用,提示連花清瘟調(diào)節(jié)免疫抗新冠病毒的作用可能是通過活性成分抑制病毒激活的IL6R/IL6/IL6ST通路相關(guān)。

進(jìn)一步通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)揭示連花清瘟治療新型冠狀病毒肺炎的作用靶點(diǎn)及信號(hào)通路,結(jié)果顯示連花清瘟中連翹主要成分金絲桃苷、蘆丁和連珠苷E是SARS-CoV-2病毒主要蛋白酶最可能的抑制劑,構(gòu)建活性成分-基因靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò),證實(shí)連花清瘟主要通過提高人體免疫力及抑制FcεRI、ErbB、MAPK等炎癥通路治療新冠肺炎。

連花清瘟作為應(yīng)用中醫(yī)絡(luò)病理論指導(dǎo)研發(fā)的治療病毒類呼吸系統(tǒng)疾病的品牌中成藥,自上市以來先后20余次列入呼吸系統(tǒng)傳染病防控權(quán)威指南或共識(shí),成為應(yīng)對(duì)病毒引起的呼吸系統(tǒng)公共衛(wèi)生事件代表性中成藥。連花清瘟正在護(hù)衛(wèi)人民呼吸健康的斗爭中發(fā)揮著越來越重要的作用。